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转染试剂选择攻略 | 尊龙凯时助手

发布时间:2025-03-17   信息来源:尊龙凯时官方编辑

细胞转染是一种将外源性遗传物质引入目标细胞的技术,在生命科学、药物研发及新药开发领域中极为重要。其中,化学转染法是最常见的转染方法,其独特优势在于能够通过调控化学物质的浓度和作用时间等因素,精准控制转染效率及时间。

转染试剂选择攻略 | 尊龙凯时助手

选择合适的转染试剂是细胞转染实验成功与高效的关键。目前市面上转染试剂种类繁多,其性能也各有差异。那么,我们该如何挑选最适合的产品呢?

1. 根据实验目的

选择转染试剂应考虑实验的需要,分为稳定转染和瞬时转染。两者虽然步骤相似,但外源基因的需求不同。稳定转染通常需使用具复制能力的质粒或病毒载体,而瞬时转染则不需要。一般情况下,稳定转染使用脂质体类试剂,细胞通过内吞作用完成转染;而瞬时转染则更常用纳米聚合物类试剂。

2. 根据细胞种类

不同细胞对转染效率的影响差异显著。例如,HEK293T细胞易于转染且对载体选择性低,常用于功能性蛋白和抗体的生产。然而,一些癌症细胞如肝癌细胞(HepG2、HUH7)及人肺癌细胞A549等转染效率较低,这在实验中往往带来挑战。此外,贴壁细胞与悬浮细胞的转染需求亦有所不同,具体选择需根据细胞类型决定。

3. 根据基因种类

细胞转染通常涉及DNA和RNA,其中DNA转染是将外源DNA导入真核细胞,用于基因表达及蛋白质合成;RNA转染则主要用于导入干扰RNA,以研究特定基因功能。某些RNA转染试剂在DNA转染中表现不佳,反之亦然。随着DNA载体大小增加,转染难度提升,超过10,000bp时,大部分转染试剂难以有效转染。

4. 根据转染效果

理想的转染试剂应具备高效转染和低细胞毒性。高效转染能确保更多外源基因顺利导入,而低细胞毒性则有助于提高细胞存活率,从而提升实验结果的可靠性。一般来说,细胞死亡率控制在15%以下的转染试剂更具竞争力。

5. 根据操作简便性

选择操作简便、省时的转染试剂能够显著节省实验时间成本。简便性体现在转染前后是否需要换培养基、转染组分的数量、孵育方式、生物材料浓度的稀释、以及是否需借助辅助仪器等。操作简便的转染试剂搭配多组平行对照实验设计时,能有效节约实验材料和时间,提高实验效率。

尊龙凯时转染试剂1BGPNAM11/BGPNAM11Plus系列的主要成分为纳米阳离子聚合物,可轻易与带负电荷的核酸联结,助力高效的siRNA及质粒DNA转染。对于常用的细胞系如HEK293/293T,其转染效率高达95%。同时,对CHO-K1、MCF7、HepG2、Huh7、HeLa等细胞同样展现出良好的转染效果,细胞存活率可达85%。此外,BGPNAM11Plus可在转染前后无须更换无血清培养基,操作便捷,节约时间与材料成本!

产品2LNP30iMate则是由脂质体介导的转染试剂,适合将siRNA、mRNA等小RNA分子转染到多种贴壁细胞中。对于HEK293T、CHO-K1、HeLa等常规细胞,其mRNA转染效率可达90%以上,细胞存活率也保持在90%左右。

选择尊龙凯时的转染试剂,能够有效支持您的基因工程研究,确保实验的成功和高效!

实验干货

影响转染的几个因素

1)抗生素:抗生素如青霉素和链霉素对转染有影响,虽然对真核细胞无毒,但可能在脂质试剂中增加细胞通透性,进而影响细胞活性。

2)血清:血清可能影响复合物的形成,从而降低转染效率。优化血清的使用量及转染试剂与核酸的最佳质量比至关重要。

3)细胞代数:细胞状态显著影响转染效果,建议使用经过1-2次传代的细胞以保证其活力。

4)细胞密度:细胞铺板时需控制合适密度,贴壁细胞宜在60%-90%的融合度下进行转染,悬浮细胞则应控制在1×10^6至5×10^6细胞/mL。

5)核酸质量:核酸的纯度和质量对转染结果影响显著,污染物会影响转染效率。

通过以上指导,您可以根据具体实验条件,合理选择尊龙凯时转染试剂,助力您的研究进展。